Media TSB

Tanggal Praktikum                           :   19 Desember 2012

Tempat                                               :   Laboratorium Biologi STABA  

I.                  Tujuan

·         Membuat media TSB

·         Mengetahui fungsi media TSB

II.               Prinsip

Intisari enzimatik kasein dan intisari enzimatik dari bungkil kedelai yang nitrogen sumber di TSB. Dextrose adalah energi sumber karbon yang memfasilitasi pertumbuhan organisme. Sodium Chloride mempertahankan keseimbangan osmotic, fosfat di potassium adalah agen tuffering.

III.           Landasan Teori

Tryptic Soy Broth, media tujuan umum, sering disebut sebagai kedelai kazsein medium digest, disingkat TSB. Media ini awalnya dikembangkan untuk digunakan tanpa darah dalam menentukan efektivitas sulfonamide tedrhadap pneumocci dan organisme lainnya. Clostridia dan non bersporulasi anaerob tumbuh subur dalam kaldu ini ketika diinkubasi anaerobic. TSB dianjurkan untuk pengujian kontaminan bakteri dalam kosmetik dan sesuai dengan standar yang ditetapkan dalam makanan dan industry.

TSB dipilih oleh USDA Hewan dan Tumbuhan Kesehatan Layanan direkomendasikan oleh Komite Nasional untuk standar laboratorium Klinik (NCCLS) untuk inokulum persiapan dalam tes harddisk difusi. TSB sesuai dengan Harmonized Amerika Serikat Pharmacopeia (USP) Eropa Pharmacopeia (EIE), dan Jepang Pharmacopeia (JP).

TSB ditambah dengan SPS dan CO adalah kaldu yang sangat baik untuk kultur darah di klinik aplikasi. Dengan penambahan NaCl 6,5% TSB dapat digunakan untuk pertumbuhan selsktif dari kelompok D-Streptokokus.

IV.           Alat dan Bahan

Alat	Bahan
-          Tabung reaksi 30 buah	-          Trypticase Soy Broth
-          Rak Tabung 3 buah
-          Batang Pengaduk
-          Gelas kimia 250 mL
-          Aquadest
-          Gelas ukur 25 mL
-          Bunsen
-          Kaki tiga + kasa asbes
-          Oven
-          Pipet Tetes
-          Autoclave

V.               Perhitungan

Perhitungan Pembuatan Media Cair TSB

           Pembuatan TSB 30 tabung

= 30 tabung @ 6 mL

= 30 x 6 mL

= 180 mL

TSB 30 gram / 1L

180 mL à

             = 5,4 gram dalam 180 mL aquadest

VI.           Langkah  Kerja :

Pembuatan TSB 30 tabung sebanyak 180 mL @ 6 mL

1.      30 tabung disterilisasi dengan oven selama 2 jam dengan suhu 160⁰ C

2.      Ditimbang 5,4 gram

3.      Dimasukkan 5,4 gram dalam gelas kimia 250 mL ditambah 180 mL aquadest

4.      Dipanaskan sampai larut sambil diaduk

5.      Dituangkan TSB sebanyak 6 ml  ke tiap – tiap tabung

6.      Dibungkus dari bawah dan diberi bundle

Sterilisasi dengan autoclave pada suhu 121^oC selama 15 menit

7.      Diangkat, diberi label identitas media, nama dan tanggal pembuatan

VII.        Pengamatan

Media berbentuk cair, berwarna kuning jernih

VIII.    Pembahasan

TSB (Trypticase Soy Broth) adalah medium dasar untuk menumbuhkan berbagai mikroorganisme. Trypticase Soy Agar digunakan untuk medium pertumbuhan dengan tujuan: mengamati morfologi koloni, mengembangkan kultur murni, pertumbuhan untuk tes biokimia. TSA juga biasa digunakan untuk penghitungan jumlah bakteri.

TSB adalah media brothdiperkaya untuk tujuan umum, untuk isolasi, dan penumbuhan bermacammikroorganisme. Media ini banyak digunakan untuk isolasi bakteri dari spesimenlaboratorium dan akan mendukung pertumbuhan mayoritas bakteri patogen.Media TSB mengandung kasein dan pepton kedelai yang menyediakan asam aminodan substansi nitrogen lainnya yang membuatnya menjadi media bernutrisi untukbermacam mikroorganisme. Dekstrosa adalah sumber energi dan natrium kloridamempertahankan kesetimbangan osmotik. Dikalium fosfat ditambahkan sebagaibuffer untuk mempertahankan pH.Trypticase Soy Agar digunakan untuk medium pertumbuhan dengan tujuan:mengamati morfologi koloni, mengembangkan kultur murni, pertumbuhan untuktes biokimia. TSA juga biasa digunakan untuk penghitungan jumlah bakteri.

Penimbangan media dilakukan secara hati-hati dan teliti. Trypticase Soy Broth ditimbang sebanyak 5,4 gram, kemudian dilarutkan  dalam aquadest 180 ml sambil dipanaskan sampai larut.

Selanjutnya media disterilisasi dengan autoclave, sebelum ke autoclave media tabung ditutup dengan bundle,dan diikat karet, hal ini dilakukan karena autoclave akan memberikan tekanan yang tinggi yang dapat menekan bundle lepas dari mulut tabung, sehingga penutup bundle harus terikat kuat dalam mulut tabung .

IX.           Diskusi

 Pemanasan media berfungsi untuk mempercepat kelarutanbubuk media

    Trypticase Soy Broth

   Media TSB mengandung kasein dan pepton kedelai yang menyediakan asam aminodan substansi nitrogen lainnya yang membuatnya menjadi media bernutrisi untukbermacam mikroorganisme

X.               Kesimpulan

   Media TSB merupakan media yang bernutrisi yang dapat berfungsi

sebagai penyubur yang mengandung kasein dan pepton kedelai yang

menyediakan asam amino dan substansi nitrogen lainnya yang

membuatnya menjadi media bernutrisi untuk bermacam

mikroorganisme

   Media TSB berbentuk cair dan berwarna kuning jernih